抑郁動物模型的造模方法找不對？

實驗動物不會選擇？

不知道有哪些常用的行為學(xué)檢測方法？

「全線賦能“沃”的實驗」之實驗方法實戰(zhàn)教程

直播第二期將為大家?guī)?/p>

《抑郁動物模型研究方法》

兩位老師為大家詳細(xì)講解

造模方法、實驗動物選擇、行為學(xué)檢測方法

涵蓋常用模型和高頻技巧，更有互動答疑

快速幫你摸清抑郁動物模型的構(gòu)建

直播時間

4月26日（周二）19：00

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直播全程免費，群內(nèi)專業(yè)答疑

主題：抑郁模型構(gòu)建方案

• 抑郁研究背景

• 抑郁動物模型構(gòu)建

• 抑郁模型構(gòu)建常用設(shè)備

講師：歐陽歡

瑞沃德資深綜合解決方案專家，主要從事運動對于神經(jīng)元發(fā)育的調(diào)控機(jī)制以及在精神情感障礙疾病模型中的干預(yù)機(jī)制相關(guān)研究，核心研究結(jié)果發(fā)表于Science Advance，專注于神經(jīng)科學(xué)細(xì)分領(lǐng)域綜合性解決方案的構(gòu)建，已為上百家客戶提供專業(yè)的神經(jīng)科學(xué)研究整體解決方案。

主題：抑郁模型行為學(xué)檢測方法

• 習(xí)得性無助實驗

• 懸尾實驗

• 強(qiáng)迫游泳實驗

• 糖水偏好實驗

• 曠場實驗

• 新奇物體探索實驗

• 新奇抑制攝食實驗

講師：徐慧玲

瑞沃德資深解決方案專家，從事神經(jīng)環(huán)路和動物行為學(xué)研究相關(guān)工作多年，在慢性疼痛的神經(jīng)環(huán)路研究、中樞系統(tǒng)的神經(jīng)元形態(tài)學(xué)檢測、情緒性行為（焦慮/抑郁）的檢測、疼痛相關(guān)行為學(xué)實驗上有著豐富的經(jīng)驗，致力于為客戶提供專業(yè)的動物行為學(xué)實驗解決方案。

上期不少小伙伴在直播間

提出互動問題，這次我們?nèi)恐v解

一、實驗操作類

1.注射針進(jìn)入目標(biāo)腦區(qū)后，可以直接進(jìn)行注射嗎？

“確定針頭到達(dá)目標(biāo)腦區(qū)后，建議停針1min，平衡氣壓，然后就可以開啟注射程序了?！?/p>

2.顱釘植入的位置如何選擇？

“顱釘?shù)闹踩胛恢脩?yīng)該盡量避免血管集中的區(qū)域及注射位點。”

3.顱骨調(diào)平的標(biāo)準(zhǔn)要求是？

“前囟和后囟高度差，Bregma左右高度差均在±0.03mm以內(nèi)，即可認(rèn)為與顱骨水平?！?/p>

4.小鼠腦部病毒注射實驗需要挑開硬腦膜嗎？

“使用較細(xì)的玻璃電極注射的時候需要挑開硬腦膜，因為電極尖端較為脆弱，而硬腦膜具有彈性阻力，可能會把尖端弄斷。同樣道理，在植入多通道電極的時，也需要挑開硬腦膜，防止電極尖端受損?！?/p>

5.腦部病毒注射實驗中，進(jìn)針?biāo)俣刃枰刂圃冢?/strong>

“進(jìn)針應(yīng)保持勻速緩慢，推薦將全自動腦立體定位儀的速度設(shè)置在0.2-0.5mm/s。”

6.使用腦立體定位儀固定小鼠，耳桿固定位置是？

“一側(cè)耳桿移至適當(dāng)位置旋緊固定，用手輕柔拖住老鼠頭部，將頭部同側(cè)枕骨大孔位置對準(zhǔn)耳桿尖端，緩慢推動另一側(cè)耳桿至枕骨大孔處?！?/p>

7.如何判斷病毒正常注射，沒有產(chǎn)生針頭堵塞等現(xiàn)象？

“在使用注射針連接玻璃電極進(jìn)行病毒注射時，可以先用空針吸取足夠的礦物油起到密封作用，再吸取一定體積的病毒，礦物油的重力作用可以保證病毒注射更為流暢。另外礦物油與病毒之間因為密度不同會出現(xiàn)明顯的液面分界線，我們可以用記號筆標(biāo)記分界線的位置，就可以很直觀觀察到注射過程中是否存在針頭阻塞現(xiàn)象了?！?/p>

二、實驗耗材類

1.腦立體定位手術(shù)中，如何保護(hù)小鼠眼睛不受光源傷害？

“固定小鼠之后，可以在小鼠眼周涂抹紅霉素眼膏，起到一定的閉光和防感染作用?！?/p>

2.光遺傳與光纖記錄使用的陶瓷插針有區(qū)別嗎？

“目前常見的陶瓷插針都是使用的石英材質(zhì)，自發(fā)熒光較低，所以可用于光遺傳和光纖記錄實驗。但是光纖記錄實驗更推薦使用黑色陶瓷插針，可以更好的避免環(huán)境光對于信號的干擾。”

3.固定的顱釘需要使用多大尺寸？什么材質(zhì)？

“小鼠用M1.0，大鼠用M1.4，M1.2介于兩者之間，成年小鼠與幼大鼠可用，一般是不銹鋼材質(zhì)?！?/p>

4.顱釘?shù)淖饔檬牵?/strong>

“如同蓋房子使用的鋼筋一樣，和牙科水泥一起可以讓植入的陶瓷插針等更加牢固。”

三、實驗技巧類

1.左右顱骨調(diào)平需要旁開多少距離？

“依據(jù)個人習(xí)慣而定，一般推薦旁開2mm左右（2-2.5mm均可）。”

2.使用牙科水泥固定，是否還需要縫合頭皮組織？

“如果備皮環(huán)節(jié)直接將注射位點上方的頭皮直接剪掉，那么直接通過牙科水泥就可以覆蓋頭部整體創(chuàng)面，不需要在縫合頭皮。如果是剪開頭皮進(jìn)行的注射，或者牙科水泥固定的范圍較小，可以將周邊的頭皮進(jìn)行縫合。”

3．病毒注射完成后，植入陶瓷插針需要重新進(jìn)行顱骨調(diào)平嗎？

“在實驗中一般不需要二次調(diào)平，使用前囟點作為參考0點，那么整體操作過程中就始終保持同一個參考點即可。如果發(fā)現(xiàn)更換夾持器或者更換實驗器材，導(dǎo)致坐標(biāo)有較大差別，可能是動物固定不夠牢固，需要重新檢查固定?！?/p>

4.光纖記錄實驗過程中需要全程避光嗎？

“當(dāng)然不建議強(qiáng)光下進(jìn)行實驗，使用黑色陶瓷插針及黑色陶瓷套管，將動物頭部的牙科水泥涂黑即可很好的避免環(huán)境光對于實驗信號的干擾。同時實驗環(huán)境前后需要保持一致，避免環(huán)境變化導(dǎo)致的數(shù)據(jù)對比問題?！?/p>

5.怎樣才能讓數(shù)據(jù)結(jié)果更加平滑？

“數(shù)據(jù)處理過程中可以選擇平滑處理功能，同時在數(shù)據(jù)采集過程中，可以改變相應(yīng)的參數(shù)（如幀率，曝光等）可以讓數(shù)據(jù)呈現(xiàn)的更加好看?！?/p>

6.光纖記錄中進(jìn)行光纖漂白的目的是？

“光纖具有一定的自發(fā)熒光，這種內(nèi)部的自發(fā)熒光會掩蓋一部分微弱的信號。常用光纖根據(jù)材質(zhì)分為普通光纖和低自發(fā)熒光光纖，普通光纖進(jìn)行光纖記錄實驗前必須進(jìn)行漂白?！?/p>

7.本底信號波動的產(chǎn)生原因？

“實驗環(huán)境的不穩(wěn)定（溫度，光線等），動物狀態(tài)都有可能導(dǎo)致本底信號波動。使用黑色陶瓷插針及黑色陶瓷套管，將動物頭部的牙科水泥涂黑可以很好的避免環(huán)境光對于實驗信號的干擾?！?/p>

8.神經(jīng)遞質(zhì)探針信號與鈣信號有什么差別？

“常見鈣信號會呈現(xiàn)出快速上升和緩慢下降的特征峰形，而遞質(zhì)類信號因為信號周期較長，上升或下降都可能需要較長的時間，所以信號較為平緩。但是不同腦區(qū)及種類細(xì)胞的鈣信號差別較大，具體實驗會有不同。（參考下面圖片——經(jīng)典鈣信號狀態(tài)）?！?/p>

四、實驗儀器類

1.光纖記錄數(shù)據(jù)分析軟件需要單獨安裝嗎？

“不需要，R820光纖記錄軟件包含數(shù)據(jù)采集功能和數(shù)據(jù)分析功能，通過一個軟件即可實現(xiàn)采集和分析，簡化實驗步驟，提高實驗效率。”

2.夾持玻璃電極的注射儀器是？

“R480玻璃微電極注射泵，可用于細(xì)胞、胚胎、顱腦等納升級顯微注射?！?/p>

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